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固体培养基的配制-培养基观察分析金相试样磨抛机 固体培养基的配制 配制固体培养基时,先配好相应的液体培养基,然后加入适量的琼脂(鞘)(如按琼脂质量百分比浓度1%~1.5%添加),用玻璃棒搅拌混匀,灭菌。 培养基配好后,要马上灭菌,否则会生长微生物,消耗培养基。有些营养成分如维生素、抗生素等,要等到培养基冷到适当温度时在无菌条件下加入,否则会因温度高破坏这些活性成分。 培养基的分装 根据不同需要,可将已配好的培养基分装入试管或锥形瓶内。 1.培养基分装于试管 用移液管取适量的培养基转移到各试管中。装入试管培养基的量依目的而定,一般液体培养基可分装至试管体积的1/4左右。对于从大肠杆菌提取质粒的实验,可以把液体培养基等分分装于1.5~2mL的一次性小塑料离心管中,在接种了细菌后,盖好这些小塑料离心管,置于锥形瓶中摇荡,以培养这些细菌。分装固体或半固体培养基时,对于琼脂培养基,水浴加热至琼脂全部融化,在不少实验室,加热用微波炉完成。在琼脂完全融化后,应趁热(约45℃时)分装于试管中。一般用于制作斜面的固体培养基分装量为试管体积的1/5,半固体培养基分装量为试管体积的1/3。 培养基分装于锥形瓶 用于摇荡培养微生物用时,一般在锥形瓶中加入1/5体积的液体培养基。用于制作平板培养基用时,在250mL锥形瓶中加入150mL培养基,然后再加入2.29琼脂粉(按质量百分比1.5%计算)。灭菌时琼脂粉被融化,灭菌后琼脂培养基适当冷却,趁热(约45℃时)分装于需要的容器(如培养皿)。 (四)棉塞的制作及试管、锥形瓶的包扎 为了培养好气性微生物,需提供优良的通气条件,同时为防止其它微生物污染,应该让进入试管或锥形瓶内的空气通过一道过滤屏障,通常方法是在试管及锥形瓶口加上棉塞等。当用一次性锡纸时,由于锡纸具有良好的成形性,所以用二层锡纸包住瓶口(或管口)即可。
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