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分光光度计波长校正就是对仪器进行一些机械调整 |
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分光光度计波长校正实际上就是对仪器进行一些机械调整波长校正 波长校正实际上就是对仪器进行一些机械调整,来改变光源灯与单色器的相对位置,使它们能在一条直线上,使波长指示盘是标明的波长与射入样品比色杯的辐射波长一致,这样才能保证波长读数与通过样品的波长相符合,才能保证仪器的***大灵敏度,否则分析结果就会出现明显的变异,在紫外光区波长较短时尤为明显。 有几种化学性质非常稳定的物质可用做标准物质,在特定的波长范围内校验仪器,例如,镨钕用于可见光区校验仪器,氧化钕用于紫外光区校验仪器,此外,还有干涉 滤光片及化学性质稳定的化学试剂及染料等可用以校正仪器。 校正方法 目前使用的分光光度计,在更换光源,重新按装、搬运或检修后,以及仪器工作不正常时,都要进行波长校正,一般每隔数日就应检查一次波长,常用的方法有如下几种。 如经上述校正后发现波长读数不在585+1nm范围内,但能看到黄光,说明波长不正确但偏差较小,可按下列步骤校正。 将波长度舯准确对准585+1nm处,打开仪器外壳,按说明书找到波长校正螺丝。 如波长585nm,但看不到黄光时,校正手续如下: 将波长度盘准确地对准585nm,打开仪器外壳,找到波长调节螺丝,在比色杯位置插入白纸条,左右轻轻旋转波长调节螺丝,使调整仪器输出,使指针为50%T左右,左右轻旋转波长调节螺丝,至透光度读数***低,当透光度***低时,波长应为585+1nm。 检查波长刻度盘的指示值,与调节到的波长529nm误差情况,例如指示值为534nm,此时波长误差为534-529=5nm.超出规定,必须进行调整同,将波长刻度调节到529nm处,将镨钕片由光路拉出,光路空白时调节100%旋转 使电表指示为100%T,并检查零点,再将镨钕片推入光路,仪器左侧小盖板,找到波长校正螺丝,反时针微微调节波长校正螺丝,使电表的透过率指示降至***低,反复检查波长误差情况,直到符合仪器技术指标要求为止,***后将左侧盖板复原,校正即结束。 光线校正法 单光束分光光度计用此法校正波长比较简单,常用氢灯、氘灯和低压汞灯,它们可发射一系列波长为定值的射线,其范围包括可见光和紫外光区,汞灯可发射不连续光谱如297、302、303、360、578nm等光波,做为波长校正使用,氘灯可发射486nm射线,也可用于波长校正,当波长再变更时,透光度又下降,记录***大透光度时的波长,然后按已知的汞线数值调正仪器的波长。金相试样镶嵌机光源为仪器厂出品,高压汞灯,超高压汞灯或其它紫外线灯管,高压汞灯是一种可见光和长波紫外线辐射很强的光源,含有丰富可作为分光光度计波长校正之用。
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